definizione
Questa procedura viene utilizzata per determinare l’attività proteolitica, espressa come unità di emoglobina sulla tirosina base (HUT): un’unità HUT di attività proteolitica è definita come quella quantità di enzima che produce un idrolizzato la cui assorbanza a 275 nm è la stessa di una soluzione contenente 1,10 µg/ml di tirosina in 0,006N acido cloridrico in 1 minuto nelle condizioni del test (pH 4,7 e 40°C).
Il test si basa sull’idrolisi enzimatica di 30 minuti di un substrato di emoglobina a pH 4,7 e 40°C: il substrato non idrolizzato viene precipitato con acido tricloroacetico e rimosso per filtrazione. La quantità di emoglobina solubilizzata nel filtrato viene determinata spettrofotometricamente.
1 HUT equivale, approssimativamente, a 6,5 USP
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